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梵通探案

行业纵览  案例分析  经验解读

—2024第017期—

细胞治疗领域正在经历一场革命性的发展。技术迭代迅速，不断推动临床应用的创新与突破，如干细胞治疗在抗衰老领域的潜力以及CAR-T细胞在淋巴瘤治疗中的显著成效。展望未来，细胞治疗领域的发展前景广阔，值得期待。已有许多调查及研究显示，世界范围内正在使用的细胞体系中支原体污染  发生率达到30％～60％。

2025版《中国药典》讨论稿也将支原体检测作为细胞产品一般安全性检查：无菌检查、支原体、细菌内毒素、异常毒性检查、外源病毒因子。

案例背景

梵通生物接到一家医院细胞房爆发支原体污染事件的求助。该机构的细胞在复苏过程中发现污染，并经过调查和对比，在细胞房的环境样本中也发现了与污染细胞相同的支原体。细胞房工作员工尽管对环境进行了初步处理，但环境中、复苏的细胞中的支原体污染情况依然严重。

支原体污染特点

没有细胞壁的原核微生物

●生存环境：

支原体能在无生命培养基中生长繁殖。

●菌落特征：

在固体培养基上培养，支原体形成典型的“荷包蛋”状菌落。

●传播途径广泛：

支原体广泛存在于人和动物体内，主要通过飞沫、性接触等途径传播。

难点1：可透过0.22µm无菌滤膜

很小，直径约0.13～0.18µm，大小介于细菌和病毒之间，可透过无菌滤膜(0.22µm)，因此在细胞培养过程中，细胞极易受到支原体污染。这个也是难点，支原体可以非常轻松的穿越高效过滤器（一般高效过滤器过滤效率0.5um以上99.999%），细胞培养的场所都配有净化空调系统，支原体可以通过空调系统到处传播。

难点2：支原体污染的细胞，不一定浑浊、变色哦

微生物污染大多数可以使培养液变浑浊、变色。用显微镜观察，可见满视野都是点状的细菌颗粒，原来的清晰培养背景变得模糊，大量的细菌甚至可以覆盖细胞，但是支原体的污染前期非常隐蔽，培养液不浑浊，不易发现。

难点3：一般抗生素对支原体无效

在细胞培养液中加入抗菌素是一种常见的预防措施，旨在防止细菌污染。在细菌污染的初期，由于培养体系中抗菌素的作用，细菌的繁殖会被有效抑制，因此细胞生长往往不会受到显著影响。然而，值得注意的是，这种抗菌措施对于支原体却并不奏效。支原体是一类特殊的微生物，具有不同于细菌的生物学特性，对很多常见的抗菌素具有耐药性。因此，即使细胞培养液中含有预防剂量的抗菌素，也无法有效防止支原体的污染。为了避免支原体对细胞培养造成的潜在影响，需要采用专门针对支原体的预防和控制措施。

梵通生物-支原体污染处理流程

污染溯源

首先，对细胞房进行全面调查，确定支原体的污染来源。这包括对细胞培养过程中的各个环节进行排查，如培养基、血清等培养用液的污染测试，以及细胞培养箱、操作台等设备的检查。

工艺设备处理

梵通对每台生物安全柜、二氧化碳培养箱等工艺设备采用梵通自主研发的GHP消毒技术，可以杀死支原体，不会对工艺设备造成损伤。

超低温冰箱、冰柜等的处理

梵通采用自主研发的低温消毒技术，让这些支原体无死角的全部杀灭。

环境处理

梵通对每台生物安全柜、二氧化碳培养箱等工艺设备采用梵通自主研发的GHP消毒技术，可以杀死支原体，不会对工艺设备造成损伤。

空调系统高效过滤器处理：

梵通对每台生物安全柜、二氧化碳培养箱等工艺设备采用梵通自主研发的GHP消毒技术，可以杀死支原体，不会对工艺设备造成损伤。

梵通生物的消毒技术团队在净化空调清洗消毒方面拥有核心技术。他们的专业工程师会针对每个空调系统进行细致的分析，精确计算风管风量和体积等关键参数，以确保制定出最合适的消毒方案。通过这种精准的方法，梵通生物能够确保风管和风口都能得到全面而有效的消毒处理，彻底消除潜在的污染风险。这种高度的专业性和严格的消毒流程，让梵通生物在净化空调清洗消毒领域赢得了客户的广泛信赖和好评。

 持续监测与预防

污染溯源

处理完成后，对细胞房环境进行持续监测，确保支原体污染得到彻底清除。同时，梵通工程师和细胞房工作人员一起讨论制定加强实验室卫生和个人卫生管理，定期对实验室进行检测和消毒，预防支原体污染的再次发生。

案例总结

本案例中，梵通生物采用梵通自主开发GHP消毒技术和多矩阵排列战术成功解决了细胞房支原体污染问题。通过全面调查、溯源、工艺设备、环境处理、空调系统以及持续监测与预防等措施，确保了细胞培养环境的洁净度和实验结果的可靠性。该案例为其他生物制品处理类似问题提供了有益的参考和借鉴。

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