细胞制备污染现状

细胞培养技术广泛应用于科研、教学、临床实验研究、细胞治疗产品生产领域。2025年国家药品监督管理局食品药品审核查验中心下发《细胞治疗产品生产检查指南》，细胞治疗产品生产过程中，大规模培养细胞对无菌操作和技术要求非常高。根据江苏省兽医研究所支原体重点实验室调查，细胞培养物的支原体污染率为15%~35%，且部分报道中高达65%~80%。

大规模细胞培养操作中容易造成微生物污染，包括细菌污染、真菌霉菌污染、病毒污染和支原体污染。

细菌污染：细菌污染是细胞培养中最为常见的微生物污染类型 细菌的个体微小、形态简单 属于原核生物界的单细胞微生物。细菌一般来源于细胞培养的操作环境之中 很少来源于已污染的培养液和血清。细菌生长繁殖速度非常快，甚至就可繁殖一代。细菌在其生长繁殖过程中不仅消耗大量的营养 还会产生很多的毒素。营养的枯竭和毒素的攻击是造成受污染细胞死亡的重要原因。

真菌污染：真菌是一种真核细胞微生物 比细菌大几十倍。对干燥、阳光、紫外线以及一些消毒剂有很强的抵抗能力。污染了酵母菌的培养物 类似于细菌污染在倒置相差显微镜下可以观察到圆形或卵原形的酵母菌 开启培养瓶皿可以闻到象酒或酸的发酵样异味。污染了霉菌的培养物 在倒置相差显微镜下 可以观察到象树枝一样生长的菌丝 长得茂盛时肉眼都能看见 象棉絮团一样。

病毒污染：病毒是一种能通过细菌滤器 大小以纳米计 不能独立地利用外界营养进行自体繁殖的微生物。细胞培养中的病毒污染可以来自原宿主细胞的潜伏性感染 也可能在培养操作中由于工作人员的疏忽使用尚未灭过菌的瓶皿带进来的。

支原体污染：支原体的特征。支原体也叫霉形体 是大小间于细菌和病毒之间的一种微生物 直径在0.2um左右 它没有细胞壁 除了含有一个环状的分子和核糖体。支原体膜更具柔顺性 对于物理因素 如压力、渗透压、脱水的抵抗力很强.它有高度的异形性。少部分可以穿过常规除菌滤膜。支原体的这些特点都成为目前细胞培养中污染微生物最多，处理难度最大的污染物。

梵通细胞污染解决方案

污染溯源：梵通工程师协助客户对污染产品的微生物种类进行检测鉴定。找到微生物的种类，来源。通过无菌采样、分离培养，借助显微镜观察形态，进行16S/ITS基因测序比对数据库鉴定微生物种类，结合来源表分析其可能来源。

制定解决方案：制定梵通自主研发的GHP消毒技术，可以有效杀死细菌、芽孢、支原体，霉菌孢子，同时不会对工艺设备造成损伤。