核酸检测技术有很多优点,一旦实验室出现核酸污染,就容易导致假阳性结果,从而影响检测的准确性。核酸污染很大因素是核酸气溶胶污染。如果不及时采取清理和采取消毒服务措施,污染会更加严重,如何避免核酸气溶胶污染并做好消毒服务措施?
如何防止核酸气溶胶污染?
1.施工要求。PCR实验室的建设需要设置标准的“四区”:试剂制备区、标本制备区、PCR扩增检测区、扩增产物检测区。每个独立的实验区都有一个缓冲区,每个区域都由气压调节,从而在整个PCR实验过程中保护试剂和样品不受气溶胶污染,减少扩增产物对人和环境的污染。
2.人员要求。进入PCR实验室,需要经过从基础理论、实验原理、标准操作、质量保证到注意事项的规范化培训,取得PCR执照。
3.检测风险。在检测过程中,样品的开启、核酸提取的摇动和离心都可能产生气溶胶,存在感染的风险。
4.保护要求。须按照生物安全三级实验室的个人防护要求进行。
目前所有的核酸检测方法都采用密闭管检测,防止开盖时形成气溶胶,并采用严格的物理隔离方法。检测依次分为试剂制备区、样品制备区、扩增区和产物检测区,压力逐级增加。这些策略可以最大程度地防止气溶胶污染,但核酸污染事故仍时有发生。因为核酸检测步骤多,样品很多环节直接暴露在空气中,任何一个环节稍有差错,都容易导致整个实验室的污染。即使严格遵循程序,也不能完全避免核酸污染。
消毒服务:实验室核酸气溶胶污染
核酸污染主要体现在样品核酸或扩增产物在桌子、设备、检测人员表面的核酸残留,以及扩增产物形成的气溶胶。由于气溶胶颗粒很小,如果不处理,可以在空气中漂浮很长时间,继续影响实验室检测。
实验室核酸污染的主要原因有:标本污染;试剂污染;产品污染;设备污染;其他污染。
如发现污染,应立即停止检验工作,确认污染消除后方可再次开始检验。首先要查清污染源,界定污染范围。然后根据污染源和污染范围,采取有效措施进行去污,多种方法结合,达到最佳效果。
实验室污染的消毒服务处理:
1.当标本污染生物安全柜控制台并造成有限污染时:
立即用吸水纸覆盖,用0.55%含氯消毒剂喷雾消毒。消毒剂需要在24小时内准备好并使用。
2.当样本倾覆并造成实验室污染时:
保持实验室空间封闭,避免污染物扩散。立即用蘸有0.55%氯消毒剂的毛巾覆盖污染区域。必要时(如大量泄漏),可用2g/m剂量的双氧水熏蒸实验室,熏蒸过夜;或用气溶胶喷雾器喷洒20g/L过氧乙酸消毒剂,用量为8ml/m,作用1-2h;
3.清理污染物时:
严格按照活病毒生物安全操作要求,采用压力蒸汽灭菌处理,实验室通风,防止二次危害。
为什么过氧化氢被称为最清洁消毒剂?
2020年初,为科学指导公众正确使用消毒剂,充分发挥消毒剂在新冠肺炎疫情防控中的有效作用,国家卫生健康委员会办公厅发布了《消毒剂使用指南》,其中明确将过氧化氢指定为新冠肺炎消毒剂之一,适用于物体表面和室内空气的消毒。味道最轻,刺激性和腐蚀性最小,由于最终分解为水和氧气,所以最环保。
核酸气溶胶污染的常规处理方法有酒精擦拭、紫外线照射、高压变性灭菌、开窗通风等,但酒精易燃,含氯消毒剂一般有腐蚀性,紫外线照射效果差,所以以上对核酸污染的去除效果还是不好。
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